簡(jiǎn)介
二代測(cè)序技術(shù)在科研、醫(yī)療等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,而選擇合適的測(cè)序儀器是確保實(shí)驗(yàn)順利開(kāi)展和結(jié)果可靠的關(guān)鍵。對(duì)于剛接觸二代測(cè)序的新手而言,面對(duì)多樣的儀器往往難以辨別其差異。為此,我們整理了主流二代測(cè)序儀器的核心信息,希望能幫助新手快速理清它們的區(qū)別,為項(xiàng)目中的儀器選擇提供有效參考。
主流二代測(cè)序儀器核心參數(shù)對(duì)比表
儀器品牌 型號(hào) | 核心測(cè)序原理 | 測(cè)序讀長(zhǎng) 范圍 | 典型通量 (單詞運(yùn)行) | 準(zhǔn)確率 Q30 | 主要優(yōu)勢(shì) |
Illumina NovaSeq | 邊合成邊測(cè)序 | 100-300bp | 最高可達(dá) 6Tb | ≥90% | 高通量模式下數(shù)據(jù)產(chǎn)出效率高,適用于大型基因組項(xiàng)目和多樣本并行分析,數(shù)據(jù)穩(wěn)定性強(qiáng) |
Illumina HiSeq | 邊合成邊測(cè)序 | 50-300bp | 最高可達(dá) 1.5Tb | ≥90% | 在中小規(guī)模項(xiàng)目中性價(jià)比突出,測(cè)序精度穩(wěn)定,適合常規(guī)轉(zhuǎn)錄組、外顯子組等檢測(cè) |
華大 DNBSEQ-T7 | 基于DNA納米球和聯(lián)合探針錨定聚合技術(shù) | 50-150bp | 最高可達(dá) 10Tb | ≥90% | 通量極高,單位數(shù)據(jù)成本較低,適合大規(guī)模人群隊(duì)列研究、全基因組關(guān)聯(lián)分析等大型項(xiàng)目 |
技術(shù)細(xì)節(jié)補(bǔ)充
測(cè)序原理影響:Illumina的邊合成邊測(cè)序原理,通過(guò)在DNA合成過(guò)程中加入熒光標(biāo)記的核苷酸,實(shí)現(xiàn)對(duì)序列的讀取,這種方式保證了較高的測(cè)序準(zhǔn)確率,但在通量提升上相對(duì)受限。華大DNBSEQ技術(shù)通過(guò)DNA納米球放大信號(hào),減少了擴(kuò)增偏差,在保證準(zhǔn)確率的同時(shí),能實(shí)現(xiàn)更高的通量。
數(shù)據(jù)質(zhì)量相關(guān):Q30是衡量測(cè)序質(zhì)量的重要指標(biāo),代表堿基識(shí)別錯(cuò)誤率低于1/1000。上述儀器均能達(dá)到較高的Q30水平,可滿足大部分科研和應(yīng)用需求。在實(shí)際應(yīng)用中,可根據(jù)具體項(xiàng)目對(duì)數(shù)據(jù)質(zhì)量的細(xì)微要求進(jìn)行選擇。
選擇建議
選擇建議:若您的項(xiàng)目是大型基因組研究,且對(duì)數(shù)據(jù)產(chǎn)出量要求極高,華大 DNBSEQ-T7 是優(yōu)先選擇;若為中小規(guī)模的精準(zhǔn)測(cè)序項(xiàng)目,Illumina HiSeq能滿足需求;對(duì)于需要大量高質(zhì)量數(shù)據(jù)的大型科研項(xiàng)目,Illumina NovaSeq更為合適。
參考文獻(xiàn)
[1]https://pdf.medicalexpo.com/pdf/illumina-inc/hiseq-3000-hiseq-4000-sequencing-systems/83632-140628.html
[2]https://www.illumina.com/systems/sequencing-platforms/novaseq-x-plus/applications/transition.html